PROGRAMA DE GENÉTICA MOLECULAR

Curso 1996-97

1. Replicación del ADN. Polimerasas del ADN. Síntesis semiconservativa. Cebadores. Primasa. Fragmentos de Okasaki. Autocorrección de las polimerasas. Eliminación de los cebadores. Sustitución de Us por Ts. Replicación del genoma bacteriano. Estructura del origen de replicación. Estructura del término. Conexión entre replicación y división celular. Ciclo eucariótico. Replicones eucarióticos. Aislamiento de orígenes de replicación de levaduras.

2. Replicación de los cromosomas. Replicación de virus de ADN unicatenario circular. Replicación del ADN bicatenario circular: replicación del plásmido ColE1 y de mitocondrias. Replicación de ADN unicatenario lineal: fago l, fagos T y adenovirus. Replicación de los telómeros. Replicación del ARN: fagos R17 y Qb, virus de la polio, reovirus y retrovirus. viroides y priones.

3. Alteraciones y reparación del ADN. Mutaciones producidas por radiaciones ionizantes. La hipótesis del blanco. Letales dominantes. Intensidad de la radiación. Efectos del oxígeno y del ambiente. Radiación ultravioleta. Mutagenos químicos. Sistemas bacterianos de reparación. Reparación por excisión. Reparación recombinatoria. Reparación de emergencia. Reparación en eucariotas. Sistemas de reparación en mamíferos. Enfermedades humanas por defectos de reparación.

4. Transcripción. ARN-polimerasa bacteriana. ARN-polimerasas de fagos. Funciones de las subunidades. Factores sigma. Proteina Rho. Proteinas NusA y NusB. El promotor clásico. Secuencias canónicas del promotor clásico. Otras clases de promotores. Influencia de secuencias externas del promotor. Terminadores dependientes e independientes de Rho. Antiterminación. Polaridad. ARN-polimerasas eucarióticas. Promotores eucarióticos. Secuencias canónicas de los promotores eucarióticos.

5. ARN mensajero. Estructura de los ARNm procarióticos. Líderes. Regiones intercistrónicas. Transcritos primarios en eucariotas: ARN "heterogeneo nuclear". Procesamiento del ARNhn. Poliadenilación. Modificaciones del extremo 5'. Eliminación de intrones. Ribonucleoproteinas de ARN pequeños (serie U). Modelo general de eliminación de intrones. ARN autocatalítico. Edición del ARNm.

6. Traducción y clave genética. Etapas de la traducción. ARNt iniciador. Factores de iniciación. Elongación. Formación del enlace peptídico. Translocación. Terminación. Factores de terminación. Aminoacil-ARNt sintetasas. La clave genética. Lógica interna de la clave. Universalidad de la clave y excepciones. Tambaleo en las bases 3ª y 1ª. Origen y evolución de la clave genética. La selenocisteina. Desfases programados y otros cambios de la pauta de lectura. Fidelidad de la traducción. Control estricto. Supresión de codones de terminación prematura. Supresión de cambios de sentido. Supresión de desfases.

7. Recombinación homóloga. Modelos moleculares. Modelo de Holliday; modificación de Meselson y Radding. Evidencia de la existencia del intermediario de Holliday. Conversión génica. Enzimología en bacterias. Vías alternativas de recombinación en E. coli: RecBCD, RecE y RecF. Mutantes hiperrec. Funcionamiento de RecA. Secuencias "Chi". Recombinación en eucariontes. Iniciación por rotura de cadena doble: modelo de Szostak.

8. Recombinación específica de sitio. En bacterias: Integración del fago lambda (secuencias att; funciones Int, Xis e IHF); Inversión de secuencias (flagelinas de S. typhimurium (sistema hin) y sistema gin de Mu). En eucariontes: Reorganizaciones programadas del genomio; Mecanismos para generar los anticuerpos.

9. Regulación de la expresión génica en procariotas. Regulación de los niveles de ARN durante su biosíntesis. Regulación coordinada de la expresión génica. El operón de la lactosa. El operón del triptófano. El fago lambda. Regulación traduccional.

10. Regulación de la expresión de los genes eucarióticos. Regulación de la transcripción: factores de transcripción, intensificadores y silenciadores. Regulación de la expresión de virus animales. Regulación génica específica de tejido y estado. Intrones: procesamiento alternativo. Empaquetamiento del ADN. Topología del ADN. Metilación del ADN.

11. Anatomía molecular de los genomas eucarióticos. ADN codificante y no codificante. Genes que codifican productos de ARN y que codifican polipptidos. Repeticiones en tándem. Secuencias repetidas dispersas. Secuencias de centrómeros y telómeros. Genomas de orgánulos eucarióticos.

12. Reordenaciones cromosómicas. Elementos genéticos móviles. Transposones. Retrotransposones. Retrogenes. Otros elementos móviles. Reordenaciones programadas y modulación de la expresión génica. Amplificación programada y modulación de la expresión génica. Amplificaciones en tándem no programadas.

13 Control genético del ciclo celular en eucariotas. Coordinación entre la replicación y la masa celular. El activador de la fase S. La kinasa de la fase M. Control por fosforilación y desfosforilación. Control del ciclo de levaduras. La proteina p34 y las ciclinas. Mutantes cdc y wee. Control de la transición G1/S.

14 Control del ciclo celular y la determinación en mamíferos. Proteinas cdks y el ciclo celular. Los inhibidores de cdks. Control del ciclo celular por pRB. La proteina p53: control del ciclo y apoptosis. Relación entre ciclo celular y determinación. Disfunciones del ciclo y carcinogénesis.

15 El destino celular. Determinación, diferenciación y desarrollo. Diferenciación y totipotencia. Diferencicación del huevo e influencias maternas en el desarrollo. Totipotencia en plantas. Transplante de nucleos y diferenciación celular. Teratomas y quimeras.

16 Desarrollo de Caenorhabditis elegans. Genética de C. elegans. Desarrollo. Linaje celular y células fundadores.

17 Genética del desarrollo de Drosophila. Desarrollo normal de Drosophila. Mapas de destino y mosaicos sexuales. Determinación de los discos imaginales. Compartimentalización. Análisis clonal. Mutaciones que afectan al desarrollo: mutaciones de efecto materno, mutaciones en la segmentación y mutaciones homeóticas.

18 Regulación génica en el desarrollo. Gradientes y cascadas. Establecimiento de los ejes antero-posterior y dorso-ventral. Genes de la segmentación. Genes homeóticos. La caja homeobox. Origen y evolución de los genes homeóticos.

19 Genética del desarrollo de mamíferos. Genes Hox del ratón. Complejos parálogos de los genes homeóticos. Inactivación de los genes Hox. Patrones de expresión de los genes Hox. El morfogén ácido retinoico.

Libros recomendados:

Singer y Berg (1993) Genes y genomas. Omega, Barcelona.

Lewin (1994) Genes 2ª ed. Revert, Barcelona.

Watson, Tooze y Kurtz (1986) ADN recombinante. Labor, Barcelona.

León y García (1992) Manual de Genética molecular. Síntesis, Madrid.

Watson, Gilman, Witkowski y Zoller (1992) Recombinant DNA. Scientific American Books, Nueva York.

Stryer (1990) Bioquímica 3ª ed. Revert, Barcelona.

Lewin (1994) Genes V. Oxford University Press, Oxford.

Suzuki (1995) Genética 5ª ed. Interamericana Mcgraw-Hill. Madrid.