INGENIERÍA GENÉTICA

Módulo teórico (3 créditos)

curso 1996/1997

OBJETIVOS

El objetivo de esta asignatura es dar las bases teóricas de los métodos utilizados en la tecnología del DNA recombinante, así como sus aplicaciones a las áreas de la Biología animal, vegetal y humana. El programa incluye también aspectos éticos relacionados con la Ingeniería Genética.

PROGRAMA

INTRODUCCIÓN

Lección 1. Objetivos y alcance de la Ingeniería Genética. Desarrollo de la tecnología del DNA recombinante: Debate inicial y estado actual. Aplicaciones.

HERRAMIENTAS BÁSICAS

Lección 2. Enzimas de restricción. Tipos y utilización. Mapas de restricción. Otros enzimas: DNA polimerasas, transcriptasa inversa, transferasa terminal, ligasas.

Lección 3. Obtención de DNA recombinante. Esquema general. Métodos básicos de clonación.Vectores de clonación. Tipos de vectores: plásmidos, fagos y cósmidos. YACs. Vectores de expresión.

Lección 4. Clonación. Transformación y transfección. Eficacia y competencia de los sistemas mas usuales. Selección de clones recombinantes.

Lección 5. Amplificación por PCR. Esquema general del método. Parámetros a tener en cuenta. Posibilidades y restricciones. Aplicaciones.

Lección 6. Hibridación de ácidos nucleicos. Fundamentos teóricos. Sondas moleculares. Métodos de marcaje y detección.

Lección 7. Hibridación en filtro:tipos. Métodos de transferencia. Hibridación en sistemas biológicos: hibridación in situ. Su aplicación en la localización y expresión de genes.

Lección 8. Secuenciación de DNA. Fundamentos teóricos. Metodología básica. Secuenciación automática. Nuevas tecnologías.

Lección 9. Genotecas: tipos, ventajas y restricciones. Rastreo de genotecas. Sondas a utilizar. Paseo cromosómico

APLICACIONES

Lección 10. Aplicación de la Ingeniería Genética al aislamiento de genes. Estrategias a seguir en genomas simples y complejos.

Lección 11. Aplicaciones de la Ingeniería Genética a la caracterización molecular de genes. Expresión en E. coli de genes clonados. Análisis de promotores. Mutagénesis dirigida

Lección 12: Proyectos genoma. Organismos modelo. Obtención de mapas genéticos y físicos. Obtención de "contigs". Estrategias de secuenciación. Repercusiones científicas y sociales.

Lección 13. Aplicaciones en genética humana: Aplicaciones al diagnóstico clínico, al aislamiento de genes implicados en enfermedades. Terapia génica. Medicina forense.

Lección 14. Ingeniería Genética en plantas(I). Cultivos in vitro de células y tejidos vegetales. Transferencia de genes. Transformación con Agrobacterium. Otras técnicas de transformación: electroporación, microproyectiles, etc.. Vectores de clonación.

Lección 15. Ingeniería Genética en plantas (II). .Plantas transgénicas. Resistencia a enfermedades, a insectos y a herbicidas. Mejora de la calidad y rendimiento. Riesgos ecológicos.

Lección 16. Ingeniería Genética en animales.(I). Métodos de obtención.de animales transgénicos. Transformación en la línea germinal de Drosophila. Transformación en ratón.

Lección 17. Ingeniería Genética en animales (II). Animales transgénicos en especies modelo. Su importancia en investigación básica y aplicada.

Lección 18. Bioingeniería. Sistemas de expresión génica en bacterias y levaduras. Aplicaciones de la Ingeniería Genética a la obtención industrial de proteínas, vacunas, antibióticos y biopolímeros.

ASPECTOS ÉTICOS

Lección 19. Debate científico y social sobre la IG. Aspectos éticos sobre el desarrollo de esta tecnología . Legislación internacional sobre el tema.

BIBLIOGRAFÍA

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NORMAS DE EVALUACION

Al final del cuatrimestre se realizará un examen final